¿Qué es TA Cloning

? Clonación TA es un método simple y conveniente de la subclonación de la reacción en cadena de la polimerasa (PCR ) . "TA " es la abreviatura de " timina " y " adenina ". Esta técnica de clonación utiliza la capacidad de timina para hibridar con adenina en la presencia de ligasas . Las enzimas de restricción no se utilizan , a diferencia del método tradicional de subclonación . En lugar de ello , los productos de PCR se amplificaron usando Taq polimerasas enzimas . Método

El método de clonación TA utiliza la actividad transferasa terminal de cierta ácido desoxirribonucleico (ADN polimerasas ), tales como la polimerasa Taq . Enzimas de polimerasa Taq no tienen actividad de corrección de pruebas y añadir preferentemente una sola , tres prima -A ( 3' -A ) saliente a cada extremo del producto de PCR .

Un vector de clonación linealizado con solo , tres prima -T ( 3' -T ) salientes llamados un vector T se utiliza para clonar este producto de PCR en un vector plásmido. El producto de PCR se mezcla con este vector en alta proporción .

ADN ligasa ( ligasa de T4 ) se añade a la mezcla , que permite que los dos productos para hibridar y unirse .

Ventajas y desventajas

de clonación TA es un método conveniente de subclonación productos de la PCR en el vector linealizado , y es mucho más simple y más rápido que los métodos tradicionales de subclonación . Debido a que este método no utiliza enzimas de restricción , productos sin sitios de enzimas de restricción pueden ser clonados .

Una desventaja es que los kits de clonación de TA son muy caros y , por lo tanto , su uso es limitado . Además , no hay clonación direccional; por lo que la probabilidad de la clonación en una dirección opuesta es mayor .
TA Cloning Kits

Varios fabricantes vende kits de clonación TA . Algunos son Invitrogen, QIAGEN y Premier Biosoft .