¿Cómo medir la temperatura óptima para una enzima

Una enzima es una proteína que cataliza (aumenta la tasa de ) las reacciones químicas. La temperatura óptima de la mayoría de las enzimas , o la temperatura a la que mejor enzimas de facilitar las reacciones , es entre 35 y 40 grados Celsius . El aumento de temperatura dentro de esta ventana aumenta la velocidad de reacción , ya que excita las moléculas y aumenta la velocidad a la que enzimas /reactivos chocan y reaccionan para hacer el producto . Sin embargo , el aumento de temperatura demasiado puede desnaturalizar la enzima y para impedir su funcionamiento en absoluto .

Determinar la temperatura óptima de la enzima por calentamiento de la reacción por cantidades infinitesimal y tomando pequeñas muestras de la reacción, para determinar cuando la tasa máxima de producción de occurs.Things productos que necesitará
Enzima sustrato

kit de ensayo para el producto
centelleo vial
Beaker
placa de calefacción
Termómetro de
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Seleccione un método. Determinar cómo se va a medir la concentración de su producto en varios puntos en el experimento. Por ejemplo , se puede medir la concentración de muchos productos usando un espectrofotómetro y el cálculo de la concentración de la absorbancia o mediante la medición de la fluorescencia y el cálculo de la concentración de la fluorescencia.
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Configure su experimento. Coloque los reactivos y enzima en un pequeño recipiente con una tapa , tal como un vial de centelleo . La reacción se iniciará . Colocar el vial de centelleo en un vaso de precipitados más grande de agua a temperatura ambiente . Colocar el vaso en una placa calefactora . Coloque un termómetro en el interior del vaso de precipitados . Esto le permite medir la temperatura de la reacción en varios puntos.
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Tomar una muestra de 100 microlitros de la reacción a temperatura ambiente, aproximadamente 25 grados Celsius. Gire la placa de calentamiento en . En varias temperaturas entre 30 y 40 grados Celsius ( 30.5 , 31, 31.5 , etc ) tomar muestras de 100 microlitros de su reacción.
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Determinar la concentración de su producto a cada temperatura . Cuando la temperatura sube por encima de 40 grados Celsius , se verá una disminución en la velocidad a la que el sustrato se convierte en producto, debido a que la enzima se desnaturaliza . El punto en el que el producto se está produciendo a la tasa máxima es el punto en el que la temperatura está en su óptimo .