¿Cómo medir el pH en la enzima lactasa Labs

La lactasa es una enzima que descompone el azúcar de la lactosa en glucosa y galactosa en el intestino delgado , los riñones y el hígado. Un ensayo de la enzima lactasa es un experimento estándar de primer año el laboratorio de bioquímica . Parte de esta práctica de laboratorio implica la medición de la eficiencia de lactasa en diversos niveles de pH para determinar su pH ideal. Usted puede lograr esto mediante la mezcla de diferentes soluciones tampón con una cantidad medida de la lactasa y su sustrato , y luego grabar la eficiencia de lactasa en un spectrophotometer.Things que necesitará Rotulador
7 cubetas espectrofotómetro
3,5 ml de ONPG ( sustituto lactosa)
4,5 ml de cada solución tampón : pH 2 , 4, 6 , 7, 8 , 10, 12
Pipetas
Espectrofotómetro
bolígrafo
libro Lab

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pH de la solución de lactosa Matemáticas 1 no marque la ventana de la cubeta de medición . Esto arruina el experimento.

Label siete cubetas de número con el rotulador .
2 ONPG es un sustituto a la lactosa. Es uno de los sustratos de esta reacción enzimática.

Añadir 0,5 ml de ONPG a cada cubeta con una pipeta limpia y seca.
3 Tome notas detalladas en su libro de laboratorio .

Añadir 4,5 ml de cada solución tampón en cubetas separadas . Por ejemplo : añadir la solución tampón pH 2 en la cubeta # 1 . Añadir la solución tampón de pH 4 a cubeta # 2 . Continúe de esta manera hasta que se cubran todas las cubetas . Utilizar una pipeta diferente para cada solución tampón para evitar la contaminación . Marque claramente el número de cubetas y el pH de la solución tampón que contiene en su cuaderno de laboratorio .
4 Move lo más rápido posible .

Utilizando una pipeta limpia y seca , añadir rápidamente 0,4 ml de la enzima lactasa a cada cubeta .
5 Trabajar con rapidez. La reacción ya ha comenzado.

Coloque las cubetas en el espectrofotómetro , cierre la tapa y ejecutar el ensayo de pH . Los resultados de la prueba le dirá el pH ideal para una reacción de lactasa .