Factores que afectan electroforética Fenómenos

La electroforesis es un fenómeno por el cual las partículas cargadas migran en presencia de un campo eléctrico . Los biólogos utilizan electroforesis para separar e identificar moléculas biológicas tales como proteínas , ácidos nucleicos y aminoácidos que existen ya sea como aniones o cationes . Varios factores , como el tamaño molecular y la forma , el pH del medio electroforético y las características del campo eléctrico aplicado , afectan a la migración de estos restos cargados . Características moleculares

El tamaño y la forma de las moléculas biológicas que influye en el índice de migración . Como una proteína aumenta de tamaño , su tasa de migración disminuye debido a las fuerzas de fricción en el medio tampón de electroforesis . Las proteínas globulares presentan una tasa de migración diferente de la de las proteínas fibrosas . Carga de una molécula depende de su disociación en el pH de la solución tampón utilizada . Como carga se incrementa de una molécula , la tasa de migración también se incrementa. Cancun
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Los iones del tampón usado en la carrera electroforética conducen la corriente aplicada entre el cátodo y ánodo . Las proteínas en la muestra interactúan con los iones en la memoria intermedia en función del pH del tampón . Esta interacción afecta a la tasa de migración de las moléculas de proteína . Los tampones con fuerzas iónicas altas causan un aumento en la corriente , que produce una mayor cantidad de calor y la reducción en la tasa de migración de proteínas . Los tampones con muy baja concentración iónica conducen a problemas en la difusión de proteínas; Esto dificulta la separación de bandas electroforéticas .

características del campo eléctrico

La migración de las proteínas depende de las características del campo eléctrico que se aplica a la muestra dispersado en el tampón . Para una tensión dada , la corriente que pasa a través del medio electroforético depende del gradiente de potencial y la resistencia del medio. A medida que los posibles aumentos de gradiente , la migración de proteínas acelera . Como la longitud del medio electroforético que las proteínas atraviesan aumenta , las proteínas se encuentran con mayor resistencia . Esto dificulta la migración de proteínas.

Efectos de la temperatura

El tiempo necesario para la separación de los componentes de la muestra es proporcional a la tensión aplicada al medio. Un aumento en el voltaje aumenta la velocidad de migración . Sin embargo , altos voltajes generan una cantidad excesiva de calor . Aumento de la temperatura altera la viscosidad y la conductividad eléctrica del medio electroforético . Esto afecta a la tasa de migración también. Los cambios de temperatura también pueden causar un cambio en la conformación de las proteínas , lo que reduce la velocidad y la eficiencia de la separación electroforética de migración.