Actividad Papel de usar con ADN recombinante

ácido desoxirribonucleico recombinante ( ADNr) es un conjunto de genes que ha venido de más de una fuente . Típicamente, es una cadena de ADN en el que se ha insertado un gen de una fuente exterior . En genética o cursos de biotecnología , los estudiantes tendrán que aprender y comprender las técnicas de recombinación generales. Crear actividades de papel para que los estudiantes completen en la clase que aumentará su comprensión de las técnicas necesarias para producir ADN recombinante; cubrir cada uno de los cuatro pasos principales en la recombinación del ADN en su actividad. Localización del gen de interés

Este es el gen que codifica para la proteína que le gustaría producir . Por ejemplo, si usted desea aumentar la dulzura de su maíz, tendrá que aumentar la producción de una proteína asociada con un mayor contenido de azúcar en el maíz. Conocimientos de un científico de la proteína ( s ) que un gen produce se basa en investigaciones previas en la literatura científica. Para esta actividad, comenzar con un gen "conocido" asociado a una proteína o rasgo.

Vez que haya encontrado el gen de interés ( que codifica para la proteína que usted quiere producir en el organismo objetivo ) , se quiere que tenga que hacer muchas copias del mismo. Esto se hace a través de una técnica conocida como reacción en cadena de la polimerasa (PCR ) . Usted puede entrar en los detalles específicos de PCR en su actividad o simplemente puede tener los estudiantes a crear múltiples copias del gen de interés. Por ejemplo , podría proporcionar a los estudiantes con las tiras de papel que contienen una secuencia de ADN que incluye el gen que influye sweetness.To simular PCR , se puede proporcionar varias fotocopias de la secuencia de ADN , o, alternativamente, se podría exigir a los estudiantes para hacer las copias a sí mismos.
Aislar a un plásmido de ADN bacteriano

Usted tendrá que encontrar un plásmido bacteriano que actuará como su vector para introducir el gen de interés (el gen que codifica para la proteína que usted quiere producir ) en el organismo objetivo. Un plásmido es un pequeño fragmento de ADN bacteriano circular. Si se corta el plásmido , un gen extraño puede ser insertado y se incorpora en el plásmido fácilmente . Entonces, cuando el plásmido se replica , todas las copias se incluyen también el gen introducido .

Puede proporcionar a los estudiantes con los recortes de papel circulares de una secuencia de ADN para simular un plásmido bacteriano . Es decir, la secuencia de ADN se escribiría en un círculo , en lugar de una tira , para imitar la forma de un plásmido . O bien, puede imprimir la secuencia de ADN de la bacteria en una tira de cinta y haga que cada estudiante de su copia en un círculo. Discuta con los estudiantes los cuales vector bacteriano que va a utilizar en su recombinación y por qué. Por ejemplo , usted podría elegir de E. coli como un vector para introducir un gen productor de insulina en un ser humano , ya que E. coli es un simbionte humana , y puede reproducir fácilmente en el intestino humano .

Encontrar el enzima de restricción correcta para cortar el ADN

para separada por corte el ADN ( tanto de fuentes - la fuente bacteriana y la fuente del gen de interés , que codifica para la proteína que usted querer producir en el organismo objetivo ) , usted tendrá que utilizar enzimas de restricción. Usted tendrá que encontrar enzimas de restricción que se corte el ADN en una secuencia específica que se ajuste a los pares de bases complementarias en los extremos del gen de interés. De esta manera , los extremos recién cortadas del plásmido bacteriano y los extremos del gen de interés serán capaces de unir fácilmente. Permitir a los estudiantes a elegir entre posibles enzimas de restricción en la actividad, y explican por qué la enzima de restricción adecuada podrá trabajar mejor .

Por ejemplo , usted podría ofrecer varios pares de tijeras, y la cinta de una pequeña etiqueta en cada región que muestra en la que la secuencia de ADN que " enzimas de restricción " podría cortar la tira de ADN. Permitir a los estudiantes a elegir qué par de tijeras que quieren usar , y asegúrese de que le cortaron la tira de ADN en la secuencia correcta de acuerdo a su elección con enzimas de restricción .
Introducción de RDNA En Host

usted finalmente tenga que introducir el ADN recombinante en el organismo huésped en el que usted desea aumentar la producción de una determinada proteína . Por ejemplo, si usted está tratando de producir maíz dulce , necesitará introducir el ADN recombinante en una planta de maíz . Discuta con los estudiantes de diversos métodos para introducir el ADN recombinante , y les permiten elegir un método que piensan que funciona mejor . Discuta las respuestas .

Una vez que el ADN recombinante se ha introducido con éxito al huésped, las células del huésped se replicarán el rDNA . La captación y la replicación del ADNr se conoce como transformación . Discutir acerca de este proceso y la terminología con los estudiantes.

Para simular el proceso de transformación en el papel, permiten a los estudiantes para unir el gen de interés (por ejemplo, el gen que influye en la dulzura de maíz ), que ha sido cortada de su secuencia de ADN más grande utilizando las " enzimas de restricción " en el paso anterior , a la plásmido bacteriano , que también ha sido cortado abierto por un ' enzima de restricción ' en el paso anterior . Use cinta adhesiva para unir las dos secuencias de ADN juntos. A continuación, podría permitir a los estudiantes a hacer fotocopias del nuevo ADN recombinante para simular el proceso de replicación .