El protocolo de extracción CTAB

El compuestos químicos bromuro de cetiltrimetilamonio , bromuro de hexadeciltrimetilamonio , bromuro de cetrimonio y bromuro palmityltrimethylammonium son conocidos indistintamente como CTAB . El producto químico se utiliza como un tampón de extracción en el ADN de secuenciación del genoma , especialmente de las plantas. CTAB Buffer Recetas

Las cantidades de los diferentes productos químicos en las recetas de tampón CTAB se diferencian por el laboratorio . Sin embargo , todas incluyen los ingredientes 1 M Tris HCl pH 8,0, 0,5 M EDTA , NaCl 5 M y H2O (a veces doblemente destilada ) . Para el componente de CTAB , algunos laboratorios utilizan bromuro de cetiltrimetilamonio , y algunos bromuro de uso hexadeciltrimetilamonio .
Planta de Preparación del tejido

Preparación del tejido de la planta puede variar dependiendo del material . Las paredes celulares y las membranas deben desglosarse para acceder al material nuclear sin ningún tipo de degradación . Por lo general , moler el material vegetal con nitrógeno líquido permite el acceso al ADN , manteniendo enzimas y productos químicos nocivos celulares inactivos .
Suspensión y centrifugación

El tejido fundamental es suspendido en el tampón CTAB y poner en un baño de agua circulante . A continuación, se mezcla con cloroformo y se centrifugó para separar las proteínas solubles y otro material. ADN se precipita de la fase acuosa y se lavó a fondo para eliminar las sales contaminantes. Se suspende el ADN purificado y se almacena en buffer TE o agua destilada estéril.